緻敏試驗
緻敏試驗
具(jù)有(yǒu)緻敏作(zuò)用(yòng)的化學(xué)物(wù)經一定途徑進入機體(tǐ)，與組織蛋白結合形成完全抗原，刺激免疫活性細胞産(chǎn)生緻敏淋巴細胞或體(tǐ)液抗體(tǐ)；經1~2周緻敏期，使體(tǐ)内免疫反應得到充分(fēn)發展，形成一定數量的緻敏淋巴細胞或特異抗體(tǐ)。當再次接觸（激發）時使機體(tǐ)對該化學(xué)物(wù)産(chǎn)生感受性增高的狀态，以一定的異常形式表現
緻敏試驗與刺激試驗的區(qū)别
刺激試驗是一個局部的炎症反應，而緻敏是全身免疫系統的反應，屬于細胞免疫應答(dá)
應用(yòng)範圍舉例：
常用(yòng)測試方法
Common test methods
豚鼠最大劑量法（GPMT） | |
封閉式貼敷法（Buehler 試驗） |
局部淋巴結試驗法（LLNA） |
其中(zhōng)豚鼠最大劑量法（GPMT）和封閉式貼敷法（Buehler試驗）是最常用(yòng)的、生物(wù)安(ān)全性評價中(zhōng)使用(yòng)率最高的兩種方法。
豚鼠最大劑量試驗是最敏感的方法，歐洲國(guó)家使用(yòng)此方法較廣泛；
封閉式貼敷試驗适用(yòng)于局部産(chǎn)品，美國(guó)常用(yòng)此方法。
局部淋巴結試驗（LLNA）被經濟與合作(zuò)發展組織接受作(zuò)為(wèi)當前豚鼠試驗的唯一替代方法，該法對動物(wù)保護方面也有(yǒu)所改善，也被認可(kě)用(yòng)于化學(xué)物(wù)緻敏活性的檢測。
測試标準
testing standard
常見測試标準：
醫(yī)療器械生物(wù)學(xué)評價 第10部分(fēn)：刺激與遲發型超敏反應試驗 ISO 10993-10:2010 | |
醫(yī)療器械生物(wù)學(xué)評價 第10部分(fēn):刺激與皮膚緻敏試驗 GB/T 16886.10-2017 |
測試步驟
Test Step
緻敏試驗-豚鼠最大劑量法（GPMT）
試驗原理(lǐ)：單一化學(xué)物(wù)采用(yòng)豚鼠最大劑量試驗，對材料在試驗條件下使豚鼠産(chǎn)生皮膚緻敏反應的潛能(néng)做出評定。
1
準備動物(wù)
2
預試驗
預試驗目的：為(wèi)了确定主試驗中(zhōng)所用(yòng)試驗樣品的濃度。
确定主試驗中(zhōng)所用(yòng)實驗樣品的濃度
為(wèi)主試驗的局部誘導階段所選擇的最高濃度應僅導緻輕度紅斑，不産(chǎn)生其他(tā)有(yǒu)害作(zuò)用(yòng)
為(wèi)主試驗的激發階段選擇的最高濃度應不使動物(wù)産(chǎn)生紅斑
3
主試驗
3.1 動物(wù)分(fēn)組
每種試驗樣品應至少使用(yòng)10隻動物(wù)，對照組至少使用(yòng)5隻動物(wù)。
10隻試驗動物(wù)和5隻對照動物(wù)如全部呈陰性反應，則再進行試驗也未必會出現陽性反應。
但是，如出現任何疑似反應時，應進行再激發，如仍有(yǒu)疑似反應，則要重新(xīn)進行試驗，最少采用(yòng)20隻試驗動物(wù)和10隻對照動物(wù)。
3.2 皮内誘導階段->局部誘導階段->激發階段
按下圖所示（A、B和C），在每隻動物(wù)去毛的肩胛骨内側部位成對皮内注射0.1mL
結果評價
Evaluation of the results
結果評價
對照組動物(wù)評分(fēn)小(xiǎo)于1，試驗組評分(fēn)≥1時，提示為(wèi)緻敏
對照組動物(wù)評分(fēn)≥1，實驗組反應超過對照組中(zhōng)最嚴重的反應，認為(wèi)緻敏
如試驗組動物(wù)出現反應的動物(wù)數多(duō)于對照組動物(wù)，但反應強度并不超過對照組，可(kě)能(néng)需要在首次激發後1周~2周進行再次激發，以明确反應